红墨水法和TTC法测定种子活力有什么不同
一、红墨水法和TTC法测定种子活力有什么不同
TTC染的是活细胞,红墨水染的是死细胞。
TTC法:凡有生命活力的种子胚部,在呼吸作用过程中都有氧化还原反应,而无生命活力的种胚则无此反应。当TTC渗入种胚的活细胞内并被还原时,便由无色的TTC变为红色的TTF。
红墨水法:凡生活细胞的原生质膜具有选择性吸收物质的能力,而死的种胚细胞原生质膜丧失这种能力,于是染料便能进入死细胞而染色。
扩展资料
TTC法的原里:
凡有生活力的种子胚部在呼吸作用过程中都有氧化还原反应,而无生活力的种胚则无此反应。
当TTC溶液渗入种胚的活细胞内,并作为氢受体被脱氢辅酶(NADH或NADPH)还原时,可产生红色的三苯基甲(TTF),胚便染成红色。
当种胚生活力下降时,呼吸作用明显减弱,脱氢酶的活性亦大大下降,胚的颜色变化不明显,故可由染色的程度推知种子的生活力强弱。TTC还原反应如下:TTC(无色),TTF(红色)。
参考资料来源:百度百科-TTC法
二、ttc法快速测定种子生命力的理论依据是什么
氯化三苯四氮唑法。
凡有生命活力的种子胚部,在呼吸作用过程中都有氧化还原反应,而无生命活力的种胚则无此反应。
TTC的氧化态是无色的,可被氢还原成不溶性的红色三苯甲月替(TTF)。
三、ttc法的优缺点
优点:TTC(2,3,5-三苯基氯化四氮唑)的氧化态是无色的,可被氢还原成不溶性的红色三苯甲月替(TTF)。
缺点:如果没有抗生素存在,则加入的试验菌即行增殖,TTC还原变成红色,试样也随之染成红色。也就是说试样呈奶的原色时为阳性,染成红色时阴性。
TTC法测定种子:
浸种温度、浸种时间和TTC浓度对快速测定种子生活力起主要作用。
TTC法测定短花针茅、大针茅、克氏针茅、贝加尔针茅种子4种针茅种子最佳染色技术条件是:短花针茅种子30℃ - 6 h- 0.3%- 40℃ -3 h,大针茅种子30℃ - 3 h- 0.1%- 40℃ - 6 h,克氏针茅30℃ - 6h- 0.3%- 35℃ - 18 h和贝加尔针茅35℃ - 12 h- 0.3%- 30℃ - 18 h。
四、种子检验的原理?
1.剥胚或切割种子的快速发芽法
凡具有生活力的种胚(包括休眠种子)一旦解除束缚(指种皮或果皮)后,消除透水、气体交换或机械障碍,在合适的温度与湿度及光暗条件下短期内迅速萌发。方法是剥取胚体置吸水纸上催芽,或切割子叶或胚乳后进行胚体培育。
2.依据酶活性测定生活力
以各种指示剂的变色来标志种子中酶活性和呼吸代谢。以TTC法最常用,此外尚有中性红、甲基蓝及麝香溴酚蓝等方法。
TTC法已列入国际种子检验协会(ISTA)的规程中,此法系利用2,3,5-三苯基氯化四唑(又称四唑,2,3,5-triphenyltetrazoliumchloride简称TTC)的颜色变化原理来准确鉴定种子的生活力。四唑为无色或淡黄色水溶性结晶,它被还原时变成红色的不溶性的三苯甲(左:月右:┲肿拥纳盍Σ煌弑蝗境珊焐某潭纫膊煌派牟课患把丈纳钋潮硎局肿由盍Ω叩偷某潭龋乐肿右话闳静簧仙
3.依据种子化学成分变化测定生活力
简便实用的是直接荧光法,把种子切成两半,取其中一半放在紫外线荧光灯照射下不产生荧光的白纸上面进行观察,一般凡具有发芽力的种子,在紫外线下产生明亮的蓝色、蓝紫色、紫色或蓝绿色的荧光,而死的种子多半是黄色、褐色以至暗淡无光,并带有各种斑点。
4.根据细胞膜的透性来测定生活力
种子细胞膜的完整性与其活力、生活力的关系十分密切,具体应用到生活力的速测上主要有以下几种方法:
(1)纸上荧光团法纸上荧光团法主要用于十字花科或其它小粒的种子上,是根据死种子细胞膜透性增大,在吸胀时具有荧光特性的有机物从细胞排出,在种子周围的纸上产生明显的荧光团的原理来检测种子生活力的。
(2)软X射线辐射照相法此法主要用于种子的饱满度、空壳率、潜伏害虫以及生活力的快速测定上,其最大优点在于:一是经过造影的种子,仍可保存或供播种用;二是可以同时检测几个项目,如虫害、空壳率、胚成熟度及生活力等;三是不受种子休眠期的影响。
此法的原理是基于老化劣变种子的细胞膜失去半透性,用重金属盐类如BaCl2、BaSO4等作为照相衬比剂处理后,受损伤的细胞能吸收衬比剂,在软X射线下照相可显示出不同程度深浅阴影,以便鉴别出种子劣变或损伤的程度。
(3)红墨水染色法此法经济而简便,是国内首创的一种染色法,其原理如上述。凡胚部深红或粉红或有密集的散状红斑者都是丧失发芽力的种子;胚部不着色者为高活力种子;而带有不同程度的浅斑块者分属低活力或中活力种子。
为了精确地了解种子的播种品质,种子活力的测定是很有必要的,除上述的生活力速测法基本上适应于活力测定外,还有下列一些已列入ISTA和AOSA(美国官方种子协会)《活力测定手册》的9种方法:抗冷测定法、加速老化法、四唑图形法、电导法、幼苗分级法、Hiltner砖砾法、幼苗生长势测定法、冷发芽法、幼根生长斜板法等,在此不作具体介绍。
种子检验是根据《农作物种子检验规程》规定的程序和方法,利用必要的仪器,结合对照《农作物种子质量标准》,对种子质量作出的一致的、正确的判断和评价。